Skip to content

Somatyczne mutacje CALR w nowotworach mieloproliferacyjnych z niezmutowanym JAK2 AD 8

2 miesiące ago

432 words

Dane dotyczące nowotworów mieloproliferacyjnych pochodzą z podgrupy egzomowej w tym badaniu, a dane AML pochodzą z Atlasu genomu nowotworu.36 Oczekuje się, że wszystkie wykryte mutacje CALR indel wygenerują zmutowane białka z nowym C-końcem (Figura 3A). Zakres C-końcowych zmian jest różny, ale wszystkie 19 różnych wariantów łączy się z utratą sekwencji 27 aminokwasów z równoczesnym wzrostem nowego peptydu składającego się z 36 aminokwasów. Te zmiany powodują utratę większości C-końcowej domeny kwasowej i sygnału KDEL. (Sekwencja aminokwasowa KDEL [Lys-Asp-Glu-Leu] jest obecna w niektórych rezydualnych endoplazmatycznych białkach retikulum i umożliwia odzyskanie tych białek z aparatu Golgiego z powrotem do retikulum endoplazmatycznego.) Ta utrata funkcji zwiększa możliwość upośledzonej retencji lub pobieranie w retikulum endoplazmatycznym. Wszystkie mutacje CALR przesuwają ramkę odczytu o jedną parę zasad, wzorzec mutacji, który jest bardzo odmienny od tego obserwowanego w znanych genach supresorowych guza, takich jak TET2 i ASXL1 (Figura 3B) .36,37 Takie geny podlegają mutacjom nonsensownym i indele, przy czym ten ostatni generuje przesunięcia ramek +1 i +2 par zasad, które często powodują przedwczesne zakończenie białka. Niezwykle stereotypowy wzór mutacji CALR implikuje silną presję selekcyjną do wygenerowania zmutowanego C-końca.
Rycina 4. Rycina 4. Lokalizacja kalretikuliny i heterogenności klonalnej u pacjentów z mutacjami CALR. Panel A pokazuje immunoblotting przejściowo transfekowanych ludzkich komórek zarodkowych nerki (HEK) 293T analizowanych pod względem FLAG (znacznik białka polipeptydowego), CALR (wykrywanie endogennej, a także transfekowanej kalretikuliny) i beta-aktyny. Delecja CALR jest wariantem L367fs * 46, a wstawka CALR jest wariantem K385fs * 47. Konstrukt ekspresyjny CALR pokazano powyżej immunoblot. CMV-Pr oznacza promotor CMV. Panel B pokazuje konfograficzne fotomikrografie komórek COS-7 przejściowo eksprymujące warianty CALR znakowane FLAG i reporter Golgiego (galaktozylotransferaza połączona z żółtym fluorescencyjnym białkiem [GalT-YFP]). Kolor czerwony oznacza FLAG; zielony, Golgi; i niebieski, jądro (dichlorowodorek 4 , 6-diamidyno-2-fenylidolu [DAPI]). Obrazy pokazują, że niezmutujący i zmutowany CALR ma wzór lokalizacji retikulum endoplazmatycznego bez zwiększonej akumulacji w aparacie Golgiego. Panel C pokazuje fotomikrografie konfokalne komórek COS-7 przejściowo koeksprymujące nieututujący (NM) CALR znakowany białkiem zielonej fluorescencji (GFP) i wariantami CALR znakowanymi FLAG. Obrazy scalone pokazują, że warianty CALR znakowane FLAG łączą się z nieumiejętnym CALR z retikulum endoplazmatycznym. Panel D pokazuje fotomikrografie konfokalne komórek mieloidalnych ze zmutowanych i niezmutowanych kolonii jednostkowych kolonii granulocytowo-makrofagowych kolonii CALR pochodzących od pacjenta z niezbędną nadpłytkowością z mutacją CALR K385fs * 47; komórki zostały wybarwione na izomerazę dwusiarczkową białka (PDI, rezydentne białko retikulum endoplazmatycznego) i endogenną CALR
[patrz też: eskulap mosina, piperine forte apteka, przychodnia ludwikowska oleśnica ]

0 thoughts on “Somatyczne mutacje CALR w nowotworach mieloproliferacyjnych z niezmutowanym JAK2 AD 8”

Powiązane tematy z artykułem: eskulap mosina piperine forte apteka przychodnia ludwikowska oleśnica